Aplicações e limites dos testes de Integridade Acrossômica e Reação Acrossômica Induzida por heparina para touros da raça Nelore
DOI:
https://doi.org/10.17523/bia.2019.v76.e1453Palavras-chave:
Andrologia, Sêmen, avaliação funcional, heparinaResumo
O objetivo do trabalho foi avaliar o desempenho e a variabilidade de resultados das provas funcionais de integridade acrossômica (IA) e a reação acrossômica induzida (RAI) em touros jovens da raça Nelore, bem como verificar suas associações com outros parâmetros andrológicos. Foram avaliadas 16 amostras de sêmen congelado de touros jovens da raça Nelore utilizando-se esfregaços em lâminas pelo método de Azul Trypan / Giemsa. A média geral da integridade acrossômica pós-congelação foi de 85 ± 6%, com redução para 76 ± 8% após quatro horas de incubação em banho maria a 37º C com meio de TALP HEPES com albumina. Os testes de RAI tiveram diferenças acentuadas entre os touros do experimento, com média 18 ± 9 %, com números máximos e mínimos de 44% a 3%. Os resultados sugerem que ambos os indutores Heparina e Heparina + Lisofosfatidilcolina (LPC) foram eficientes e devem ser utilizados nas avaliações de RAI. Na comparação entre touros de alta a baixa RAI quanto a diversos parâmetros andrológicos, houve diferença (p<0,05) apenas para motilidade pré-congelação entre os grupos, com resultados superiores para os touros de baixa RAI (‰¤ 17%). Quanto as correlações dos parâmetros andrológicos e as provas funcionais da qualidade espermática (IA e RAI), somente a motilidade espermática esteve negativamente correlacionada a RAI (€“0,51, p<0,05). Concluiu-se que os testes de integridade acrossômica e reação acrossômica induzida são importantes testes complementares para avaliação da qualidade funcional dos espermatozoides, uma vez que apresentam alta variabilidade entre touros e baixa associação com outros parâmetros andrológicos. Entretanto, os mesmos devem ser interpretados dentro dos limites de avaliação dos processos associados a qualidade espermática, e não como um indicador amplo e único da fertilidade ou capacidade fecundante de touros.
Downloads
Referências
ADDAD, R.; FRENEAU, G.; RESENDE, L.; SILVA, L. Avaliação clínico-andrológica em touros nelore e testes de viabilidade espermática, integridade de acrossoma e fragmentação de cromatina ao longo de três estações reprodutivas. Ciência Animal Brasileira, v.10, p. 1044-1054, 2009.
ASSUMPÇÃO, M.E.O.D.; HAIPECK, K.; LIMA, A.S.; MELLO, M.R.B.; OLIVEIRA, L.J.; OLIVEIRA, V.P.; TAVARES, L.M.T.; VISINTIN, J.A. Capacitação espermática in vitro com heparina e cálcio ionóforo e sua correlação com a fertilidade em touros. Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, São Paulo, v.39, p. 149-156, 2002. https://doi.org/10.1590/s1413-95962002000300008
BERNECIC, N.; GADELLA, B.; LEAHY T.; GRAAF, S. Novel methods to detect capacitation-related changes in spermatozoa. Theriogenology, v.137, p.56-66, 2019. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2019.05.038
BIRCK, A.; CHRISTENSEN, P.; LABOURIAU, R.; PEDERSEN, J.; BORCHERSEN, S. In vitro induction of the acrosome reaction in bull sperm and the relationship to field fertility using low-dose inseminations. Theriogenology, v.73, p.1180–1191, 2010. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2009.10.010
BLOTTNER, S.; NEHRING, H.; TORNER, H. Individual diferences in capacitation of bull spermatozoa by heparin in vitro: relationship to fertility. Theriogenology, v.34, n.3, p.619-628, 1990. https://doi.org/10.1016/0093-691x(90)90017-n
CUNHA, A.T.M.; CARVALHO, J.O.; GUIMARÃES, A.L.S.; LEME, L.O.; CAIXETA, F.M.; VIANA, J.H.M. Bovine epididymal spermatozoa treatment for in vitro fertilization: Heparin accelerates fertilization and enables a reduction in coincubation time. PLoS ONE, 14, 2019. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0209692
COLÉGIO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL - CBRA. Manual para exame andrológico e avaliação de sêmen animal. Belo Horizonte: CBRA, 2013. 103p.
COSTA, M.Z.; OLIVEIRA, L.Z.; RESENDE, M.V.; LUCIO, A.C.; PERINI, A.P.; MIGUEL, M.C.V.; LIMA, V.F.M.H. Induction of the acrosome reaction test to in vitro estimate embryo production in Nelore cattle. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 62, p. 771-777, 2010. https://doi.org/10.1590/s0102-09352010000400001
DEN DAAS, J.H.G. Prediction of bovine Male Fertility. 1997. 168p.
DIDION, B.A.; DOBRINSKY, J.R.; GILES, J.R.; GRAVES,C.N. Staining procedures to detect viability and the true acrossome reaction in spermatozoa of various species. Gamete Reserch, v.22, p.51-57, 1989. https://doi.org/10.1002/mrd.1120220106
FELICIANO SILVA, A.E.D. Reação acrossômica induzida: método indicador de fertilidade de touros. Brasília: Embrapa Recursos Genéticos e biotecnologia, 1998. 38p., documento 35.
FERNANDES, C. E.; SOUZA, F. F.; SOUZA-NETO, J. A.; RIBOLA, P. E. M. Heparin-binding proteins of seminal plasma in Nellore bulls. Ciência Rural, v.39, 2009. https://doi.org/10.1590/s0103-84782008005000044
HAFEZ, E.S.E. Reprodução Animal. 7ª ed. São Paulo: Ed. Manole, 2004. 513p.
GONÇALVES, P. B. D., FIGUEIREDO, J. R., FIGUEIRÊDO FREITAS, V. J. Biotécnicas aplicadas à reprodução animal. São Paulo: Editora Roca, 2008.
JANUSKAUSKAS, A.; GIL, J.; SODERQUIST, L. Relationship between sperm response to glycosaminoglycans in vitro and Non-return rates of Swedish dairy AI bulls. Reproduction in Domestic Animals, v. 35, p.207-212, 2000. https://doi.org/10.1046/j.1439-0531.2000.00212.x
LI, C., WANG, D., ZHOU, X. Sperm proteome and reproductive technologies in mammals. Animal Reproduction Science, 173, p.1–7, 2016. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2016.08.008
KJAESTAD, H.; ROPSTAD, E.; ANDERSEN, K.B. Evaluation of spermatological parameters used to predict the fertility of frozen bull semen. Acta Veterinaria Scandinavica, v.34, p.299-303, 1993.
KUMARESAN, A.; JOHANNISSON, A.; HUMBLOT, P.; BERGQVIST, A.S. Effect of bovine oviductal fluid on motility, tyrosine phosphorylation, and acrosome reaction in cryopreserved bull spermatozoa. Theriogenology, v.124, p.48-56, 2019. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2018.09.028
LOWRY, O.H.; ROSENBROUGH, N.J.; FARS, A.L. Proteins measurement with the folin phenol reagent. Journal of Biological Chemistry, v.193, p.265-275, 1951.
MORANI, E.S.C.; RODRIGUES, L.H.; RONCOLETTA, M. Manual de reprodução nas espécies domésticas: Avaliação e empregabilidade do sêmen, v.1. São Paulo: Medvep, 2018. 232p.
NAGASE, H.; NIWA, T. Studies on deep freezing technique for bull semen. III. Deep freezing of bull semen in tablet form. The Japanese journal of animal reproduction, v.9, p.93, 1963.
NASCIMENTO, E.F.; SANTOS, R.L. Patologia da reprodução dos animais domésticos. Rio de Janeiro: Guanabara koogan, 2010. 172p.
MONTES, J.; TORRES, M.; RUGELES, C.; ALMANZA, R.; GUIMARÃES, J. In vitro induction with heparin of acrosome Reaction in frozen Brahman and Gyr bulls semen. Revista UDCA Actualidad & Divulgación Científica, v.15, p.431 - 436, 2012.
PALHANO, H.B. Reprodução em bovinos-fisiopatologia, terapêutica, manejo e biotecnologia. 2.ed. Rio de Janeiro: Editora LF Livros, 2008. p.181-224.
PARRISH, J.J. Bovine in vitro fertilization: in vitro oocyte maturation and sperm capacitation with heparin. Theriogenology, v.81, p.67–73, 2014. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2013.08.005
PARK, Y.J.; PANG, W.K.; RYU, D.Y.; SONG, W.H.; RAHMAN, M. S.; PANG, M.G. Optimized combination of multiple biomarkers to improve diagnostic accuracy in male fertility. Theriogenology, v.139, p.106-112, 2019.
SENEDA, M. M., SILVA-SANTOS, K. C., MARINHO, L.S. R. Biotechnology of animal reproduction. New York: Nova Science Publisher's, Inc., 2016.
SUAREZ S.S. Mammalian sperm interactions with the female reproductive tract. Cell and tissue research, v.363, p.185-194, 2015.
SUTOVSKY, P. Sperm capacitation, the acrosome reaction, and fertilization. In: Douglas Carrell, M.P. (ed.). Reproductive endocrinology and infertility: integrating modern clinical and laboratory practice. New York, NY: Springer Science + Business Media, LLC, 2010. p. 389–421.
SAMPAIO, I.B.M. Estatística aplicada à experimentação animal. Belo Horizonte: FEP-MVZ, 1998.
WATANABE, Y.F., WATANABE, M.R., FRANCESCHINI, P.H. Relação entre a motilidade espermática e características do acrossoma na produção in vitro de embriões em Nelore. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.23, 1999.
Publicado
Edição
Seção
Licença
Os autores não serão remunerados pela publicação de trabalhos, pois devem abrir mão de seus direitos autorais em favor deste periódico. Por outro lado, os autores ficam autorizados a publicar seus artigos, simultaneamente, em repositórios da instituição de sua origem, desde que citada a fonte da publicação original seja Boletim de Indústria Animal. A revista se reserva o direito de efetuar, nos originais, alterações de ordem normativa, ortográfica e gramatical, com vistas a manter o padrão culto da língua e a credibilidade do veículo. Respeitará, no entanto, o estilo de escrever dos autores. Alterações, correções ou sugestões de ordem conceitual serão encaminhadas aos autores, quando necessário. Nesses casos, os artigos, depois de adequados, deverão ser submetidos a nova apreciação. As opiniões emitidas pelos autores dos artigos são de sua exclusiva responsabilidade. Todo o conteúdo deste periódico, exceto onde está identificado, está licenciado sob a Licença Creative Commons Attribution (CC-BY-NC). A condição BY implica que os licenciados podem copiar, distribuir, exibir e executar a obra e fazer trabalhos derivados com base em que só se dão o autor ou licenciante os créditos na forma especificada por estes. A cláusula NC significa que os licenciados podem copiar, distribuir, exibir e executar a obra e fazer trabalhos derivados com base apenas para fins não comerciais.